【质控标准】

1.   阴性质控品的检测结果应为阴性，无指数扩增期，Ct=40或无Ct；

2.   阳性质控品的检测结果应为阳性，有明显的指数扩增期，Ct值应小于等于35；

3.   以上要求需在一次实验中同时满足，否则该次实验视为无效。

【结果判断】

1.   阳性：有明显的指数扩增期，且Ct＜38；

2.可疑：有明显的指数扩增期，且38≤Ct<40，此时样本为可疑样本；对于可疑样本建议复核一次，若复核结果Ct<40且有指数扩增期，则判定为阳性，否则判定为阴性；

3.   阴性：无指数扩增期，Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。

【对检验结果的解释】

1.   实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果；

2.   试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，可能会导致出现假阴性结果。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

规格：50T
分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

有效期：一年

货期：现货PCR试剂盒的有效期一般为1年，这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下，产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。

柱式病毒RNA提取试剂盒PCR反应的特异性决定因素为：

　　　①引物与模板DNA特异正确的结合；

　　　②碱基配对原则；

　　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

　　　④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

phospho-MEF2C(Thr300)  磷酸化肌细胞增强因子2C抗体高车前素

Megsin  丝氨酸蛋白酶抑制剂B7抗体高乌甲素

MEF2D  肌细胞特异性增强因子2D抗体藁本内酯

phospho-MEF2D(Ser180)  磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体根皮苷

phospho-MEF2D(Ser444)  磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体根皮素

Melamine  三聚氰胺抗体钩藤碱

Melamine  三聚氰胺抗体钩吻素子

Melanoma HMB45/Melanoma/Melan-A/MART-1  黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体枸橘苷

Met Enkephalin  甲硫氨酸脑啡肽抗体枸橼酸血根碱

MEK1/MAPKK1/MEKK1  MEK1/MAPKK1抗体(N-端)光甘草定
柱式病毒RNA提取试剂盒NMDAR2B  谷氨酸受体2B抗体巴西苏木素

Phospho-NMDAR2B (Tyr1252)  磷酸化谷氨酸受体2B抗体菝葜皂苷元/知母皂苷元

Phospho-NMDAR2B (Tyr1336)  磷酸化谷氨酸受体2B抗体白当归素

Phospho-NMDAR2B (Ser1480)  磷酸化谷氨酸受体2B抗体白果内酯

Phospho-NMDAR2B (Ser1303)  磷酸化谷氨酸受体2B抗体白花丹醌（白花丹素）

NR2C/NMDAR2C  谷氨酸受体2C抗体白花前胡丙素

NR2D/NMDAR2D  谷氨酸受体2D抗体白花前胡丁素

NRAS  原癌基因N-Ras抗体白花前胡甲素

NR1D1/REV-ERB alpha  细胞核受体Rev-Erbα抗体白花前胡素E

Phospho-NR1D1(Ser55/59)  磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体白桦酯酸/桦木酸
【结果分析条件设定】

u 基线（Baseline）设定：应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域（所有样本荧光信号无较大波动），起始点（Start）应避开荧光采集起始阶段的信号波动，终止点（End）应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环，建议基线设为6~15。

u 阈值(Threshold)设定：将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。