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用途
用于大肠杆菌O157的分离和鉴定
组分
琼脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 13.0 g/L 色素1.2 g/L
pH值 6.9± 0.2
操作
1、取瓶内干粉29.2g溶于1000mL去离子水的洁净三角瓶中,充分搅拌混匀。也可根据需要按照29.2 g/L的比例扩大或缩小制备培养基的量。
2、加热至100℃,不停搅拌,使其完全溶解。切勿加热超过100℃,切勿121℃高压灭菌。若使用微波炉加热,应将培养基加热沸腾,立即移出,轻轻摇匀,再放入微波炉加热,观察小气泡变为大气泡,直至完全溶解即可。切勿使培养基溢出。
3、加热后的培养基冷却至45℃~50℃,轻轻地摇动均匀,倾注平皿,使其凝固,晾干备用。
保存
该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存2周(2℃~8℃,避光)。
质量控制
1、外观
此干粉培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈淡黄色。制备好的培养基平板为淡黄色透明固体。
2、微生物实验
接种以下菌株于该培养基平板上,在36±1℃恒温条件下有氧培养18~24h。
质控菌株 | 菌落颜色 |
大肠杆菌O157:H7 ATCC 35150 | 淡紫色 |
大肠杆菌ATCC25922 | 深蓝色 |
克雷伯氏菌ATCC13883 | 深蓝色 |
粪肠球菌ATCC29212 | 抑制 |
性能及局限
大肠杆菌O157灵敏度为98%(Bettelheim
et al.
1998)。但缺乏亚碲酸钾时,各种非大肠杆菌O157菌株可以出现相同颜色的菌落(如沙门氏菌)。建议通过乳胶试验验证可疑菌落。大肠杆菌O157的鉴定需要做血清学实验。对于来源于食品原料、生肉生食蔬菜、环境污水等的样品,可选用科玛嘉改良O157显色培养基。
贮存条件
干粉需保存于15℃~30℃干燥环境中,在有效期前使用。
污染处理
使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。
附:供体外诊断使用,半岛bd体育手机客户端
须专业人员操作。