保存条件
-20℃保存。
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说明
蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶,可以切割脂肪族氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸羧基端连接的酯键和肽键。分子量大小为28.9 kDa(单体)。该酶属丝氨酸类蛋白酶,其水解的最小多肽是四肽分子。
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特点
即用型溶液
在多种反应条件下均有活性
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用途
基因组DNA的制备。
失活RNase、DNase以及反应中的其他酶类。
质量控制
相关检测表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、蛋白酶污染。
活性单位定义
1个活性单位是指在37℃、1min内产生相当于1μm酪氨酸的Folin阳性氨基酸或多肽所需的酶量。
分析底物为变性血红素。
酶活分析混合物:0.08 M磷酸钾(pH 5.0),5 M尿素,4 mM氯化钠,3 mM氯化钙和16.7 mg/ml血红素。
保存缓冲液
50 mM Tris-HCl(pH 8.0)
5 mM 氯化钙
50%(v/v)甘油
备注
1 蛋白酶K的推荐工作浓度为0.05-1 mg/ml)。0.2%SDS或1-4 M尿素可刺激该酶的活性。
2 Ca2+可以保护蛋白酶K不会自我降解、增加蛋白酶K的热稳定性、调节蛋白酶K的底物结合位点。
3 在宽pH值(4.0-12.5)范围内保持稳定,**pH值范围是7.5-8.0。