半岛bd体育手机客户端 组分

注：本半岛bd体育手机客户端 分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的半岛bd体育手机客户端 ，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类半岛bd体育手机客户端 的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。
 
保存条件
    -20℃保存1年。
    请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。
 
半岛bd体育手机客户端 说明
    Plus Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时，仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染(加样次数减少)。同时，由于体系内含有优化剂与增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有两种末端：平末端与3'-dA。
    Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍，扩增片段的长度可达20 kb(简单模板)。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时，Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶，可用于复杂模板的PCR扩增。
 
半岛bd体育手机客户端 特点
    使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
    快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
    可重复：降低污染和加样错误风险。
 
半岛bd体育手机客户端 用途
    杂模板PCR扩增
    高通量复杂模板PCR扩增
    高重复性复杂模板PCR扩增
    制备TA克隆用PCR产物
 
活性定义
    一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
 
质量控制
    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。
 
2×Plus Mix的组分
  100 mM KCl
  20 mM Tris-Cl
  3 mM MgCl₂
  400 mM dNTP混合物
  0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酶
  溴酚蓝等
 
应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
 
以λDNA为模板，扩增1kb片段。

 
反应条件

 
备注
    1、建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
    2、Plus Mix的扩增产物有两种末端：平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。
    3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)