SHZ88-LUC荧光标记细胞株
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名称 SHZ88-LUC 半岛bd体育手机客户端
介绍
细胞特性： 1)组织来源于实验动物的正常眼组织。 2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。 3)经鉴定细胞纯度高于90%。 4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
特性： 安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况 （一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。 注意事项： 1、观察细胞zui好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。 实验报告： 一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 1-对甲基苯磺酰咪唑 (S)-(+)-1,2-异亚丙基甘油 (S)-(+)-1,2-异亚丙基甘油 (S)-(+)-1,2-异亚丙基甘油 4,6-甲基-2-巯基嘧啶 4,6-甲基-2-巯基嘧啶 4,6-甲基-2-巯基嘧啶 4,6-甲基-2-巯基嘧啶 1-甲基-1-丙基吡咯烷双(三氟甲磺酰)亚盐 1-正丁基-1-甲基吡咯烷(三氟甲基磺酰)酰亚 SHZ88-LUC荧光标记细胞株Aspartate aminotransferase,GOT/GPT ELISA KitHPLC≥98%100mLHGV IgG ELISA kit Pulmonary surfatcant-associated protein C,SP-C ELISA KitHPLC≥98%100mLTestosterone,T ELISA Kit Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 ELISA KitHPLC≥98%100mLHomovanillic acid,HVA ELISA Kit dopamine transporter,DAT ELISA KitHPLC≥98%100mLhigh risk papillomavirus L1-capsids你 Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA KitHPLC≥98%100mLMethemoglobin,MHB ELISA Kit transforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA KitHPLC≥98%100mLhCG ELISA Kit major basic protein,MBP ELISA KitHPLC≥98%100mLUltrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit
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