碧云天的质粒大量抽提试剂kit盒(Plasmid Maxi Preparation Kit, Plasmid Maxiprep Kit)是一种用于从大肠杆菌中进行大量质粒抽提的离心柱式试剂kit盒。
本试剂kit盒适用于常用的EndA^-菌株DH5A、JM109和XL-1 e等。对于EndA⁺菌株如JM110、BL21 (DE3)、TG1和HB101
等，可以顺利完成质粒抽提，但从EndA⁺菌株中抽提获得的质粒会有轻微的核酸酶污染，如果在内切酶缓冲液中37℃孵育1小时会导致质粒全部降解。从EndA⁺菌株中抽提质粒时推荐使用碧云天的D0007S/D0007M 质粒小量抽提试剂kit盒(通用型)、D0020质粒中量抽提试剂kit盒(通用型)和D0028质粒大量抽提试剂kit盒(通用型)。
野生型大肠杆菌中表达Endonuclease I，能切割并降解双链DNA。编码Endonuclease I的基因是endA，如果endA突变失活，其基因型会被标注为endA1，相应的突变菌株被称为EndA^-菌株，而野生型菌株则被称为EndA⁺菌株。常见的EndA^-和EndA⁺菌株参见附表1。从EndA⁺菌株中抽提的质粒，微量核酸酶和质粒结合而容易被共纯化，导致容易降解。
本试剂kit盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使质粒能在离心过柱的瞬间，结合到质粒纯化柱上，在一定条件下又能将质粒充分洗脱，从而实现质粒的纯化。无需酚氯抽提，无需乙醇沉淀，6个样品只需不足90分钟即可完成。
每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限大于500微克。每个纯化柱可用于抽提100毫升左右用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD260和OD280比值也会因菌种不同等原因而略有波动。
本试剂kit盒抽提得到的质粒可直接用于转染细胞，DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化tissue内切酶消化等。
包装清单：

保存条件：
室温保存，保质期一年。
注意事项：
初次使用前把试剂kit盒提供的RNase A全部加到溶液I (悬浮液)中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
初次使用前在溶液IV (洗涤液)中加入150ml，混匀，并在瓶上做好标记。
温度较低时，溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。溶液II请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
溶液II使用完后，一定要盖紧瓶盖，防止被空气中二氧化碳酸化。
溶液II有强碱性，溶液II和溶液III对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本试剂kit盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
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为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。