大鼠外周血树突状细胞(DC细胞)冻存的细胞该如何开始培养

　　(1) 将一管细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。

　　(2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。

　　(3) 将冻存管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。

　　(4) 用70%的酒精冲洗冻存管，然后擦去多余酒精。以便保持抑制胰蛋白酶的活性用新的培养基重新悬浮细胞

　　(5) 打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹(注意，由于冻存管有负压，开盖时可能会有少量溢出，这是正常现象)。

　　(6) 用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

　　(7) 盖好培养瓶的盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

　　(8) 将培养瓶放入培养箱中(37℃，5%CO2，95%空气)

　　(9) 放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基，以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

　　大鼠外周血树突状细胞(DC细胞)完全培养基 高校合作商细胞培养过程中，多久更换一次培养基?

　　这取决于细胞生长的速度。一般而言2-3天更换一次培养基，许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。培养基可以正常使用

　　注意：冻存细胞复苏后，在6-16小时内更换培养基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。　　② 用吸管吹打形成细胞悬液后，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。