一、半岛bd体育手机客户端
概要
喹诺酮类(QNs)又称吡酮酸类或吡啶酮酸类,是一类十分重要的广谱抗生素药物,能抑制细菌 DNA 螺旋酶。其常在牛、猪和鸡等家禽养殖中被作为兽药使用。特别是鸡、猪和鱼、虾等的养殖企业均使用其来防治家禽传染病,已成为兽医临诊和水产养殖中最重要的抗感染药物之一。由于其耐药性和潜在的致癌性引起广泛的关注。欧盟理事会条例中对部分喹诺酮类药物的最大限量值 MRL 作出了明确的规定。
本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代药物残留检测半岛bd体育手机客户端
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分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间为 45min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、实验原理
本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法,在酶标板微孔上预包被喹诺酮类抗原,样本中残留的喹诺酮类药物和微孔上预包被的抗原竞争喹诺酮类抗体(抗试剂),加入酶标二抗(酶标物)后,经 TMB 底物显色,样本的吸光值与其残留物喹诺酮类药物的含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中残留物喹诺酮类药物的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测组织、蜂蜜、牛奶、奶粉等样品中喹诺酮类药物的残留量。
四、交叉反应率
环丙沙星 (CIF) …………………………………………… 100 %
恩诺沙星 (ENR) …………………………………………… 200 %
诺氟沙星 (NOR) …………………………………………… 150%
氧氟沙星 (OFL) …………………………………………… 60 %
达氟沙星 (DAN) …………………………………………… 60 %
沙拉沙星 (SAR) …………………………………………… 50 %
麻保沙星(MAR)……………………………………………… 12%
依诺沙星 (ENO) …………………………………………… 85 %
培氟沙星 (PEF) …………………………………………… 61 %
洛美沙星 (LOM) …………………………………………… 73 %
氟啶酸沙星 (ENX) ………………………………………… 110 %
双氟沙星 (DIF) …………………………………………… 50 %
氨氟沙星 (AMI) …………………………………………… 75%
五、包装组成
酶标板、标准液×6瓶、高浓度标准品、喹诺酮类抗试剂、喹诺酮类酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、喹诺酮类浓缩样品稀释液、试剂盒说明书、质控报告、盖板膜
六、样本前处理
(一)组织方法一(鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、蟹肉)(此方法与华安麦科磺胺类试剂盒组织方法相同)
1g 样品加入甲醇,涡动,离心,取上层液体氮气流下吹干(以上处理步骤畜禽、水产一致)
a. 畜禽类组织样本
吹干后,加入样品稀释液 I,再加入正己烷,振荡摇匀;离心;取下层液体分析。
b. 水产类组织样本
吹干后,加入样品稀释液II,再加入正己烷,振荡摇匀;离心;取下层液体分析。
(二)组织方法二(鸡肉、猪肉、鱼肉、虾肉、蟹肉)(此方法与华安麦科磺胺类试剂盒组织方法相同)
称取1g样品,加入去离子水,涡动;离心,取上层液体加入去离子水,涡动混匀;分析。
(三)蜂蜜前处理方法
称取 1g 蜂蜜样品,加入碳酸盐缓冲液,涡动,溶解蜂蜜样品;加入蜂蜜样品提取液,涡旋,再加入无水硫酸钠,涡旋;离心,取上层液体氮气流下吹干;加入样品稀释液 I充分振荡溶解干燥的残留物;分析。
(四)牛奶、鸡蛋前处理方法
称取 1g 样品,依次加入终止液和甲醇充分涡动;离心,取上层液体加入去离子水,涡动混匀;分析。
(五)奶粉前处理方法
称取 1g 样品,加入碳酸盐缓冲液,涡动至样品完全溶解;依次加入乙腈和二氯甲烷,涡动;加入无水硫酸钠,涡动,离心;取上清液在氮气流下吹干;加入样品稀释液 I及正己烷振荡摇匀;取下层液体分析。
七、操作步骤
1、将所需试剂回温;
2、取所需数量的微孔板
3、洗涤工作液在使用前也需回温;
4、将样品和标准品对应微孔按序编号;
5、加标准品/样品;
6、洗板;
7、加酶标物;
8、显色;
9、测定。
八、结果判定
粗略判定:用样品的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
九、检测方法灵敏度、检测限、精密度
试剂盒灵敏度:0.5μg/kg
试剂盒检测限:
组织方法一、蜂蜜样本、奶粉样本 ……………………… 2μg/kg
组织方法二 ………………………………………………… 5μg/kg
牛奶、鸡蛋样本 …………………………………………… 4μg/kg
精密度:试剂盒的变异系数均小于 10%
十、贮藏条件及保存期
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃;
保存期: 该半岛bd体育手机客户端
有效期为12个月。