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编号:HCM0225/HCM0250A/HCM0215/HCM0250B
一、 用途
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC分析。
亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
本亲和柱可用于样品中黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2、M1、M2)的样品提取、净化。
二、 概述
黄曲霉毒素是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,主要存在于谷物、花生、坚果、棉籽、饲料、植物油以及动物组织和血液中。其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性、致癌性、污染频率均居于首位。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。牛乳及其制品易受到黄曲霉毒素M1污染。
三、 原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素,然后注入到分析半岛游戏平台官网入口网址
中用于检测。
四、 包装组成
每一个盒中包括各种规格黄曲霉毒素免疫亲和柱及1份说明书。
五、 注意事项
----使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25℃)。
----亲和柱2~8℃储存,不得冻存。
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
----pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
----上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
----黄曲霉毒素B1可致癌,应戴手套操作。
----使用过的容器及黄曲霉毒素B1溶液最好用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。
六、 样品处理
方法一:适用于玉米、小麦等粮食作物,花生及其制品,坚果、植物油,中药、饲料等样品
样品(固体样品需粉碎,并过分样筛)加入氯化钠与提取液混匀;高速均质,用快速定性滤纸过滤,收集滤液;取滤液加入蒸馏水稀释,再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:1
方法二:适用于茶叶样品
样品加入氯化钠, 加入纯甲醇溶液1混匀;高速均质,用快速定性滤纸过滤,收集滤液;取滤液加入蒸馏水稀释,再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:2
方法三:适用于牛乳样品
取牛乳样品,加热到35℃~37℃,温浴;离心;恢复至室温;取中间液体上样,避免取到管壁及管底的乳脂及沉淀。
稀释倍数:0.025
方法四:适用于婴幼儿奶粉
称取奶粉,用蒸馏水溶解、混匀,定容;离心;恢复至室温;取中间液体上样,避免取到管壁及管底的乳脂及沉淀。
稀释倍数:0.125
方法五:适用于成人奶粉
称取奶粉,用蒸馏水溶解、混匀,定容;离心;恢复至室温;取中间清液上样,避免取到管壁及管底的乳脂及沉淀。
稀释倍数:0.25
方法六:适用于酸奶、奶酪及乳酸饮品
称取样品,加入乙腈,震荡混匀;离心;恢复至室温;取上层清液,用蒸馏水定容,混匀,全部上样。
稀释倍数:0.4
七、 操作程序
上样、洗涤、洗脱
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
* 也适用于GB/T 18979-2003、SNT 1736-2006、GB 5413.37-2010及药典方法。
八、 判读结果
黄曲霉毒素的含量=检测浓度×稀释倍数
九、 贮藏条件及保存期
贮藏条件:2~8℃;
保存期:该半岛bd体育手机客户端
有效期为12个月。