• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

• 限制性内切酶酶切位点：G/GTACC

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自醋酸钙不动杆菌（ Acinetobacter calcoaceticus）65（S.K. Degtyarev）的 Acc65I 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 μg pBC4 DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer? r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer? r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 μg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 10%
  NEBuffer? r2.1: 75%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 25%

  稀释兼容性

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 μg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  同裂酶

  Asp718I
  KpnI
  KpnI-HF
  

• 稀释液 A

• 注意事项

1. Acc65I 是 KpnI 的异裂酶。

2. 在 NEBuffer 2.1 缓冲液中可能出现星号活性。

3. 某些 dcm 和 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切