染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒

Dye-quantitative Real-time PCR Kit forUniversalHemoplasma

货号：Mqs-hae-20 规格：20个反应

货号：Mqs-hae-50 规格：50个反应

货号：Mqs-hae-100 规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，可作为嗜血支原体通用试剂盒使用，可检测绝大部分目前已知的嗜血支原体。

2，使用热启动的Taq酶，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

3，带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性，以及验证待测样品中是否含有PCR抑制剂。

4，带有ROX参比染料，帮助校正加样误差和管间差异。

5，带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

6，本试剂盒灵敏度高，可检出反应液中最少达1-10个基因组。

嗜血支原体（Hemotropic mycoplasmas，或hemoplasmas）寄生于多种哺乳动物血液中，附着于红细胞表面，无细胞壁，具多形性，可通过血液传播。嗜血支原体曾被命名为血巴尔通体/血巴通氏体（Haemobartonella）和 附红细胞体（Eperythrozoon），分类为立克次氏体属，现已重新归类为支原体属。临床上嗜血支原体可引发溶血性贫血症，其他症状还包括：厌食症、昏睡症、脱水、体重减轻、突然死亡等，有时表现为急性发作，也有很多动物感染后症状轻微或无症状。不同种动物感染的嗜血支原体有遗传相似性，提示有跨物种传播的可能性。目前已在猫、狗、猪、牛、羊、驼、鼠等动物中发现嗜血支原体，很多动物的血液支原体感染仍为未知状态。

嗜血支原体尚不能体外培养，一般采用PCR法在血液或组织样本中检测。常规PCR方法较为繁琐，耗时较长，较易产生非特异性扩增；探针法实时定量PCR具有更强的特异性，较少受到残留DNA的污染，较难识别未知物种；SYBR法实时定量PCR可兼具二者的优点，通过熔解曲线来区分不同的PCR产物，提高检测的特异性，相较探针法，又可在一定程度上识别未知物种。

染料法嗜血支原体通用实时定量PCR试剂盒采用SYBR染料法，根据嗜血支原体的16S rRNA基因序列，设计通用引物，可识别寄生于常见哺乳动物（如：猫、犬、猪、牛、羊、鼠等）的所有已知嗜血支原体。通过BLAST验证，本试剂盒与非嗜血支原体的其他物种无交叉反应，个别物种可能产生的非特异信号可通过Tm值轻易排除。使用本试剂盒对320个猫血样进行检测，获得139个阳性。对扩增产物进行测序，证实为嗜血支原体特异性扩增，其中包括猫的全部三种嗜血支原体。

本试剂盒可识别的嗜血支原体包括：Mycoplasma haemofelis、CandidatusMycoplasma haemominutum、CandidatusMycoplasma turicensis、Mycoplasmahaemocanis、CandidatusMycoplasma haematoparvum、Mycoplasma suis、Mycoplasmawenyonii、CandidatusMycoplasma haemobos、Mycoplasma ovis、Mycoplasma haemomuris、Mycoplasma coccoides、CandidatusMycoplasma haemolamae、Mycoplasma erythrodidelphis、CandidatusMycoplasma kahanei等。

下表列出已知的可识别嗜血支原体种类：

支原体	宿主	支原体	宿主
CandidatusMycoplasma haemohominis	人	Mycoplasma wenyonii	牛
Mycoplasma coccoides	鼠	CandidatusMycoplasma haemobos	牛
CandidatusMycoplasma haemomuris	鼠	Mycoplasma ovis	羊
Mycoplasma haemofelis	猫	CandidatusMycoplasma haemovis	羊
CandidatusMycoplasma turicensis	猫	CandidatusMycoplasma erythrocervae	鹿
CandidatusMycoplasma haemominutum	猫	CandidatusMycoplasma haemocervae	鹿
Mycoplasma haemocanis	犬	CandidatusMycoplasma kahanei	猴
CandidatusMycoplasma haematoparvum	犬	CandidatusMycoplasma haemomacaque	猴
Mycoplasma suis	猪	Mycoplasma erythrodidelphis	负鼠
Mycoplasma parvum	猪	Mycoplasma haemozalophi	海狮
CandidatusMycoplasma haemolamae	羊驼	CandidatusMycoplasma haemomeles	獾

本试剂盒包含热启动Taq酶、dNTP（以UTP代替了TTP）、引物、阳性对照品、SYBR Green I染料、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG（尿嘧啶-N-糖苷酶），用户只需准备好DNA样品即可使用。

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