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介绍 半岛bd体育手机客户端 及特点 本公司开发甘鹿流胶病菌PCR试剂盒,它具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供DNA模板。 2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增甘鹿流胶病菌,与其他病原没有交叉反应。 3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。 5、本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。 自备试剂 样品DNA。 使用方法 一、样品DNA的制备 1、用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式细菌DNAout。 2、如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加10μL甘鹿流胶病菌PCR阳性对照的1000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。 二、设置PCR反应(40μL体系) 3、对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
4、按下表设置PCR反应:
三、电泳检测 5、取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。PCR产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。 |
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