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PCR/RT-PCR >> PCR试剂盒
葡萄细菌性疫病菌PCR试剂盒
葡萄细菌性疫病菌PCR试剂盒图片
包装: 50次
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半岛bd体育手机客户端 别名:Xylophilus ampelinus PCR Kit
半岛bd体育手机客户端 介绍

半岛bd体育手机客户端 及特点

细菌性疫病是由黄单孢杆菌(属细菌)侵染所致。病菌主要在种子内越冬,也可随病残体在土壤中越冬。本半岛bd体育手机客户端 就是根据 PCR原理开发检测葡萄细菌性疫病菌的试剂盒,它具有下列特点:

1、即开即用,用户只需要提供 DNA模板。

2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增葡萄细菌性疫病菌,与其他细菌没有交叉反应。

3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4、PCR  mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR  50次,但只能用于科研。

规格及成分

成份编号十孔盒包装
PCR  MagicMix  3.0908051 mL(红盖)
超纯水1009351 mL(亮黄色)
葡萄细菌性疫病菌 PCR引物混合液13-5220yw100 μL(白盖)
葡萄细菌性疫病菌 PCR阳性对照(1×108拷贝/μL)60908-5220pc50 μL(黄盖)
核酸释放剂(试用装)6120220次(1 mL,绿盖)
使用手册13-5220sc1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂

样品 DNA。

使用方法

一、样品 DNA的制备

1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20次核酸释放剂试用装。

2、如果有 N个样品,则需要做 N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL葡萄细菌性疫病菌 PCR阳性对照的 1000倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA放冰上待用。

二、设置 PCR反应(40μL体系)

3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:

成分

N+2个样品管PCR阴性对照PCR阳性对照
PCR  MagicMix  3.0各 20 μL20 μL20 μL
葡萄细菌性疫病菌 PCR引物混合液各 2 μL2 μL2 μL
N+2个样品 DNA模板各 18 μL--
PCR阴性对照(水)-18 μL-
PCR阳性对照(葡萄细菌性疫病菌 PCR阳性对照的 1000倍稀释液)--18 μL

4、按下表设置 PCR反应:

过程温度时间
预变性95℃5 min
PCR反应(35个循环)95℃30 sec
PCR反应(35个循环)55℃30 sec
PCR反应(35个循环)72℃20 sec
最后延伸72℃7 min

三、电泳检测

5、取 10-20  μL PCR产物。电泳检测 PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。

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