半岛bd体育手机客户端 介绍
半岛bd体育手机客户端 及特点 牛传染性胸膜肺炎(又称牛肺疫)是由丝状支原体丝状亚种引起的一种高度接触性传染病,以渗出性纤维素性肺炎和浆液纤维素性胸膜肺炎为特征。本病易感动物主要是牦牛、奶牛、黄牛、水牛、犏牛、驯鹿及羚羊。各种牛对本病的易感性,依其品种 、生活方式及个体抵抗力不同而有区别 ,发病率为60%-70%,病死率约 30%-50%,山羊、绵羊及骆驼在自然情况下不易感染,其他动物及人无易感性。主要传染源是病牛及带菌牛。据报道,病牛康复 15个月甚至 2-3年后还能感染健牛。本半岛bd体育手机客户端 是根据 PCR原理开发检测牛传染性胸膜肺炎的试剂盒,它具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供 DNA模板。 2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增牛传染性胸膜肺炎,与其他微生物没有交叉反应。 3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。 5、本试剂盒足够做 40μL体系的 PCR 50次,但只能用于科研。 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。 自备试剂 样品 DNA。 使用方法 一、样品 DNA的制备 1、用自选方法纯化 N+2个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 20次核酸释放剂试用装。 2、如果有 N个样品,则需要做 N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是牛传染性胸膜肺炎 PCR阳性对照的 10000倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA放冰上待用。 二、设置 PCR反应(40μL体系) 3、对 N+2个样品,在 PCR时需要增加一个 PCR阳性对照和一个 PCR阴性对照,故需要设置 N+4个反应。在 N+4个 PCR管中分别加入下列成分:
4、按下表设置 PCR反应:
三、电泳检测 5、取 10-20 μL PCR产物。电泳检测 PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。预期 PCR产物阳性对照必须有 131bp条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10倍后重复 PCR扩增以排除 PCR抑制剂的感染。 |
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