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PCR/RT-PCR >> PCR试剂盒
乳酸杆菌属通用PCR试剂盒
乳酸杆菌属通用PCR试剂盒图片
包装: 50次
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半岛bd体育手机客户端 别名: Lactococcus spp.PCR Kit
半岛bd体育手机客户端 介绍

半岛bd体育手机客户端 及特点

乳酸杆菌属(Lactococcus spp.)是指能使糖类发酵产生乳酸的细菌,酸牛奶中有此菌。是一群生活在机体内益于宿主健康的微生物,它维护人体健康和调节免疫功能的作用已被广泛认可,它不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料(在理论上具有重要的学术价值),而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域具有极高的应用价值,因此乳酸杆菌属检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:

1、即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。

2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增乳酸杆菌属。

3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5、本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。

6、本半岛bd体育手机客户端 只能用于科研。

规格及成分

成份

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

90805

1 mL(亮黄盖)

超纯水

100935

1 mL(蓝色)

乳酸杆菌属PCR引物混合液

13-32300yw

100μL(白盖)

乳酸杆菌属PCR阳性对照

13-32300pc

100μL(黄盖)

DNA释放剂试用装

130982

50次(试用装)

使用手册

13-32300sc

1份

运输及保存

低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂

样品DNA。

使用方法

一、样品DNA的制备

1、如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。

2、用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的DNA释放剂,本半岛bd体育手机客户端 的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。

二、设置PCR反应(40μL体系)

3、对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品管

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR MagicMix 3.0

各20μL

20μL

20μL

乳酸杆菌属PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2个样品DNA模板

各18μL

-

-

样品制备阴性对照

-

18μL

-

样品制备阳性对照

-

-

18μL

4、按下表设置PCR反应:

过程

温度

时间

预变性

94℃

5 min

PCR反应(35个循环)

94℃

20sec

58℃

20sec

72℃

30sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测

5、取10-20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

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