半岛bd体育手机客户端 介绍
半岛bd体育手机客户端 及特点 乳酸杆菌属(Lactococcus spp.)是指能使糖类发酵产生乳酸的细菌,酸牛奶中有此菌。是一群生活在机体内益于宿主健康的微生物,它维护人体健康和调节免疫功能的作用已被广泛认可,它不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料(在理论上具有重要的学术价值),而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域具有极高的应用价值,因此乳酸杆菌属检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。 2、引物经过精心优化,专一性强,只扩增乳酸杆菌属。 3、提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 4、PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。 5、本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。 6、本半岛bd体育手机客户端 只能用于科研。 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。 自备试剂 样品DNA。 使用方法 一、样品DNA的制备 1、如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。 2、用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的DNA释放剂,本半岛bd体育手机客户端 的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。 二、设置PCR反应(40μL体系) 3、对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
4、按下表设置PCR反应:
三、电泳检测 5、取10-20μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本半岛bd体育手机客户端 提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。 |
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