半岛bd体育手机客户端 介绍
半岛bd体育手机客户端 及特点 网状内皮增殖病是由网状内皮组织增殖症病毒(Reticuloendotheliosis Virus,REV)引起的一种肿瘤性传染病,病鸡表现为贫血、消瘦,生长缓慢等。病理解剖特点是肝脏、肠道、心脏和其它器官有淋巴瘤,胸腺和法氏囊萎缩,腺胃炎。本病能侵害机体的免疫系统,可导致机体免疫机能下降或继发其它疾病。本半岛bd体育手机客户端 就是专门用于 REV的 RT-PCR检测的试剂盒,它具有下列特点: 1、即开即用,用户只需要提供病毒 RNA模板。 2、提供阳性对照,便于在遇到问题时分析原因。 3、引物根据 REV病毒保守的 LTR序列设计,不与其他病毒发生交叉反应。 4、使用两步式 RT-PCR,先做 RT再做 PCR,操作更加灵活。 5、本试剂盒灵敏度可以达到 1000拷贝/反应。 6、本试剂盒足够 50次 20 μL体系的 RT反应,50次 40 μL体系的 PCR反应。 7、本半岛bd体育手机客户端 只用于科研 规格及成分
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12个月。收到试剂盒后**请将阳性对照放置到专门区域,因为其含有较高浓度的扩增产物,容易污染其他试剂。 自备试剂 样品 RNA。 使用方法 一、样品 RNA的制备 1、如果有 N个样品,必须设置 N+2个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL试剂盒提供的阳性对照再加上一定量的水作为制备的阳性对照(加水后其总体积跟样品一样,样品体积多少取决于所用试剂盒的要求)。可以用水作为制备的阴性对照。使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。必须在专门的区域操作。 2、用自选方法纯化 N+2个样品的 RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 RNA提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送 15次 RNA病毒裂解液试用装(一管式病毒 RNAout的成分)。 二:设置 RT反应 3、如果有 N+2次 RNA提取,则按照下表设置 N+2个 RT反应体系(20 μL体系):
4、42℃保温 60 min,70℃保温 10 min以终止反应,然后放置在冰上待用。此为 cDNA样品。三、设置 PCR反应 5、对 N+2个 cDNA样品,则在 N+4个 PCR管中加入下列成分(多的一个是 PCR阴性对照,一个是 PCR阴性对照):
6、上机进行 PCR,PCR反应参数为:
7、取 10uL PCR产物直接在 1%琼脂糖凝胶上电泳,正确的扩增产物的大小为 220 bp。阳性对照必须出现 220bp的 PCR产物,否则 RT-PCR体系有问题,需要寻找原因。如果阴性对照出现 220bp的 PCR产物,则说明试剂或环境中有过去 PCR产物的污染,需要把样品制备和 PCR反应后电泳充分隔离进行。如果发生了污染,则需要另外设计引物,本试剂盒提供的引物和阳性对照将不可用。 |
相关半岛bd体育手机客户端
|