• 这是一种切刻内切酶
• 产生的“DNA”分子是切刻的，而不是切断的
• 这是一种创新酶（EFI）。EFI 创新酶工程由 NEB 发起，旨在为科研界提供****的酶，从而为新的创新应用的发现创造条件。这些创新酶具有独特的特性和特异性。
• 限制性内切酶酶切位点：CACGAG

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus）并经修饰的 Nb.BssSI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内将 1 μg 超螺旋 pUC19°DNA 转换为开环 DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer? r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer? r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 10%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 25%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  300 mM NaCl
  10 mM Tris-HCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

• 注意事项
  1. 在 50℃ 下温育会产生 3 倍的活性。
  2. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。
  3. 如需了解该酶（以及其他切刻酶）在不同温度下活性的详细信息，请参阅不同温度对切刻内切酶的影响。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。