- 这是一种切刻内切酶
- 产生的“DNA”分子是切刻的,而不是切断的
- 限制性内切酶酶切位点:GCTCTTC(1/-7)
Nt.BspQI 是一种切刻内切酶,仅切割双链 DNA 底物上的一条链。
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大肠杆菌菌株,表达经过基因工程改造的 BspQI 限制性内切酶突变体。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,50℃ 下,1 小时内将 1 μg 超螺旋 pUC19°DNA 转换为开环 DNA 所需的酶量。反应条件
1X NEBuffer? r3.1
Incubate at50℃
1X NEBuffer? r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 ?g/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: <10%
NEBuffer? r2.1: 25%
NEBuffer? r3.1: 100%
rCutSmart? Buffer: 10%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
500 ?g/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
80℃ for 20 minutes甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
在不同温度下的活性
@37℃: 50%
- 注意事项
- 在 37℃ 温育活性为 50%。
- 如需了解该酶(以及其他切刻酶)在不同温度下活性的详细信息,请参阅不同温度对切刻内切酶的影响。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
- 参考文献
- Song, Q. et al. (2010). Anal.Chem.
. 82(5), 2074-81. DOI: 10.1021/ac902825r, PubMedID: 20121068
- Zhang, P. et al. (2010). ProteinExpr. Purif. 69, 226-234. [Epub 2009 Sep 9].