• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：C/TRYAG

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自粪链球菌（ Streptococcus faecium）（A. Meloni）的 SfcI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 75%
  NEBuffer? r2.1: 50%
  NEBuffer? r3.1: 25%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  BfmI
  BstSFI
  SfeI+
  

• 注意事项
  1. 建议反应体系中 SfcI 的浓度不小于 1 unit/?g DNA。
  2. SfcI 在 37℃ 反应中活性保持 1 小时，1 小时后不再消化底物。如需了解更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的存活性。
  3. 25℃ 温育会大幅增强 SfcI 的稳定性。虽然该酶在 25℃ 时只有 25% 的活性，但在酶切超螺旋质粒时，我们仍建议 25℃ 温育 4 至 16 小时。25℃ 条件下，0.1 单位的酶可以在 16 小时内酶切 1?g 底物 DNA。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
  5. 甘油浓度 ＞5% 条件下可能出现星号活性