• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：GCATC（5/9）

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自粪链球菌（ Streptococcus faecalis）ND547（ATTCC 49761）的 SfaNI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g ΦX174 RF I DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer? r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer? r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: <10%
  NEBuffer? r2.1: 75%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 25%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切

  同裂酶

  BmsI
  LweI
  

• 注意事项
  1. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切。
  2. 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性