• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 酶切位点：CC/NGG

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大肠杆菌菌株，其携带从 乳脂链球菌（Streptococcus cremoris）F（C. Daly）克隆的 ScrFI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 100%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 C

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  250 mM NaCl
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  1 mM DTT
  0.15% Triton? X-100
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
  CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

  同裂酶

  Bme1390I
  BmrFI
  BstSCI
  MspR9I
  StyD4I
  

• 注意事项
  1. ScrFI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基突出的 5? 末端，它比平末端更难连接。
  2. dcm 和 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。
  3. 延时酶切可能产生星号活性。