- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 限制性内切酶酶切位点:G/GGCCC
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来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自假单胞菌属(
Pseudomonas species)OM2164(S.K. Degtyarev)的 PspOMI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg pXba DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 10%
NEBuffer™ r2.1: 10%
NEBuffer™ r3.1: <10%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
500 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
同裂酶
ApaI
Bsp120I
- 注意事项
- PspOMI 是 Bsp120I 的同裂酶。
- 某些 dcm 甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切。CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断对哺乳动物基因组 DNA 的酶切。