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酶试剂 >> 限制性内切酶
PmeI
PmeI图片
半岛bd体育手机客户端 别名: 限制性内切酶PmeI
限制酶产地: 国产限制性内切酶
半岛bd体育手机客户端 介绍
  • 符合省时酶(Time-Saver? )标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
  • 在 CutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • 限制性内切酶酶切位点:GTTT/AAAC

半岛bd体育手机客户端 来源

大肠杆菌菌株,携带有来自门多萨假单胞菌( Pseudomonas mendocina)(B. Zhou)的 PmeI 基因。

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,在 37℃ 下,1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart? 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart? 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 ?g/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer? r1.1: <10%
    NEBuffer? r2.1: 50%
    NEBuffer? r3.1: 10%
    rCutSmart? Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    100 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 ?g/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    65℃ for 20 minutes

    甲基化敏感性

    dam甲基化: 不敏感
    dcm甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

    同裂酶

    MssI

  • 注意事项

    1. 该内切酶在切割某些超螺旋质粒时活性较低,酶切 1 ug 质粒 DNA 需要超过 1 个单位的酶量。如需完全酶切 1 ug 质粒 DNA,请采用我们推荐的酶切方案。
    2. 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。如需了解更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
    3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。

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