• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 限制性内切酶酶切位点：CCANNNN/NTGG

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自荧光假单胞菌（ Pseudomonas fluorescens）（R. Morgan）的 PflMI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer? r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer? r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 0%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 50%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  AccB7I
  Van91I
  

• 注意事项
  1. λ DNA 上的特定 PflMI 位点，切割效率明显低于其他底物。
  2. dcm 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
  3. 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性