• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割。
• 限制性内切酶酶切位点：GGTGA（8/7）

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大肠杆菌菌株，携带来自副溶血嗜血杆菌（ Haemophilus parahaemolyticus）（ATCC 49700）的 HphI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 50%
  NEBuffer? r2.1: 50%
  NEBuffer? r3.1: <10%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 阻断酶切
  dcm甲基化: 阻断酶切
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  AsuHPI
  

• 注意事项
  1. 有人提出 HphI 可能在 N₉/N₈处切割，具体取决于识别位点和切割位点之间的序列（Kang, C. and Wu, C.-W. (1987)Nucl. Acids Res.15, 2279-2294; Cho, S.-H. and Kang, C. (1990)Mol. Cells1, 81?86.）。在 ΦX174 DNA 上，使用 > 12 个单位的酶，温育时间超过 4 小时，会产生额外的切割产物。在其它 DNA 上，尚未出现此现象。低 pH 值和高甘油浓度会增强这种活性。
  2. dcm 甲基化阻断该酶酶切。如需了解更多信息，请参阅 Dam-Dcm 和 CpG 甲基化。
  3. 延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性
  4. 延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性