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半岛bd体育手机客户端 别名: |
限制性内切酶HgaI
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限制酶产地: |
国产限制性内切酶 |
半岛bd体育手机客户端 介绍
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割。
- 限制性内切酶酶切位点:GACGC(5/10)
半岛bd体育手机客户端 来源 大肠杆菌菌株,携带来自鸡嗜血杆菌(
Haemophilus gallinarum)(ATCC 14385)的 HgaI 基因。
- 特性和用法
单位定义 一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 ?g ΦX174 DNA 所需的酶量。反应条件 1X NEBuffer? r1.1 Incubate at 37℃ 1X NEBuffer? r1.1 10 mM Bis-Tris-Propane-HCl 10 mM MgCl2 100 ?g/ml 重组白蛋白 (pH 7 @ 25℃) 在不同缓冲液中的活性 NEBuffer? r1.1: 100% NEBuffer? r2.1: 100% NEBuffer? r3.1: 25% rCutSmart? Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液 10 mM Tris-HCl 50 mM KCl 1 mM DTT 0.1 mM EDTA 50% Glycerol 200 ?g/ml BSA pH 7.4 @ 25℃ 热失活 65℃ for 20 minutes甲基化敏感性 dam甲基化: 不敏感 dcm甲基化: 不敏感 CpG甲基化: 阻断酶切 同裂酶 CseI
- 注意事项
- 在已知的 3,000 多种限制性内切酶中,只有少数几种酶能够产生超过 4 个碱基的突出末端,HgaI 就是其中一种。
- 建议消化每 ?g DNA,HgaI 的用量不 > 5 个单位。
- HgaI 在没有底物的情况下会失去活性,37℃ 条件下,1 小时后基本无活性。
- 因为反应中酶的稳定性,即使温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率,除非增加酶量。如需了解更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- CpG 甲基化阻断酶切。
- 延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性
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