- 在 rCutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
- 限制性内切酶酶切位点:CCCGC(4/6)
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大肠杆菌菌株,携带有克隆自水生黄杆菌(
Flavobacterium aquatili)(S.K. Degtyarev)的 FauI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,55℃ 条件下,1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。反应条件
1X rCutSmart? 缓冲液
Incubate at55℃
1X rCutSmart? 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 ?g/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 100%
NEBuffer? r2.1: 50%
NEBuffer? r3.1: 10%
rCutSmart? Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
0.1 mM EDTA
200 ?g/ml BSA
50% Glycerol
1 mM DTT
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 阻断酶切
在不同温度下的活性
@37℃: 50%
- 注意事项
- 基于反应中酶的稳定性,除非增加酶量,否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
- CpG 甲基化阻断酶切。
- 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性