- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 限制性内切酶酶切位点:CCTNN/NNNAGG
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来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自大肠杆菌(
Escherichia coli)CDC A-193(ATCC 12041)的 EcoNI 基因
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,在 37℃ 下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 50%
NEBuffer™ r2.1: 100%
NEBuffer™ r3.1: 75%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
同裂酶
BstENI
XagI
- 注意事项
- EcoNI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基突出的 5´ 末端,它比平末端更难连接。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。