- 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 限制性内切酶酶切位点:G/TAC
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大肠杆菌菌株,携带有克隆自小球藻病毒(
Chlorellavirus)NC64A(NY-2A)(J.L.Van Etten)的 CviQ-I 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,25℃ 下,1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。反应条件
1X NEBuffer? r3.1
Incubate at25℃
1X NEBuffer? r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 ?g/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 75%
NEBuffer? r2.1: 100%
NEBuffer? r3.1: 100%
rCutSmart? Buffer: 75%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
250 mM NaCl
0.1 mM EDTA
200 ?g/ml BSA
50% Glycerol
1 mM DTT
0.15% Triton? X-100
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
同裂酶
AfaI
Csp6I
RsaI
RsaNI
在不同温度下的活性
@37℃: 25%
- 注意事项
- CviQI 是 RsaI 的同裂酶。
- 在 NEBuffer r2.1 和 rCutSmart 缓冲液中可能出现星号活性。
- 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。