- 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
- 限制性内切酶酶切位点:GCAGTG(2/0)
BtsI-v2 是 BtsI 经基因工程改造的优化版本。(NEB 在名称中使用“v2”或“HF”来表示经基因工程改造的酶。)
半岛bd体育手机客户端 来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自嗜热葡萄糖芽孢杆菌(
Bacillus thermoglucosidasius)(X. Pan)并经修饰的 BtsI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。反应条件
1X rCutSmart? 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart? 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 ?g/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 100%
NEBuffer? r2.1: 100%
NEBuffer? r3.1: 25%
rCutSmart? Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 ?g/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
- 注意事项
- 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
- 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。
- 延长酶切时间、高浓度酶或 >5% 的甘油浓度可能产生星号活性