高保真（HF）限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性，但经过改造后显著降低星号活性，并使用统一的缓冲液（rCutSmart^?缓冲液）。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较，虽然价格相同，但性能和性价比更高：

• 为提高性能进行基因工程改造

• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性

• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切

• 降低星号活性

• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料

• 限制性内切酶酶切位点：GTATAC

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus）38M（Z. Chen）并经修饰的 BstZ17I 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 μg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 100%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 10%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 μg/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  同裂酶

  BssNAI
  Bst1107I
  SnaI+
  

• 稀释液 A

• 注意事项

  
  

1. BstZ17I 是 BssNAI 和 Bst1107I 的完全同裂酶。

2. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。

3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。