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酶试剂 >> 限制性内切酶
BstEII-HF?
BstEII-HF?图片
半岛bd体育手机客户端 别名: 限制性内切酶BstEII-HF?
限制酶产地: 国产限制性内切酶
半岛bd体育手机客户端 介绍

高保真(HF?)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart?缓冲液)。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较,虽然价格相同,但性能和性价比更高:

  • 为提高性能进行基因工程改造

  • 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性

  • 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切

  • 降低星号活性

  • 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料

  • 限制性内切酶酶切位点:G/GTNACC

高保真(HF)限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性;统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶(Time-Saver)标准,可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA,也可实现过夜酶切而不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标,可在更宽的条件下具有完全活性,最大限度地减少非特异性酶切产物,并且为实验设计提供灵活性。

半岛bd体育手机客户端 来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌( Bacillus stearothermophilus)ET(N. Welker)并经修饰的 BstEII-HF 基因
  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart? 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart? 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 μg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer? r1.1:<10%
    NEBuffer? r2.1: 10%
    NEBuffer? r3.1:<10%
    rCutSmart? Buffer: 100%

    稀释兼容性

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 μg/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    甲基化敏感性

    dam甲基化: 不敏感
    dcm甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 不敏感

    同裂酶

    BstPI
    Eco91I
    EcoO65I
    PspEI

    • 稀释液 A

  • 注意事项

    1. 在 3,000 多种已知的限制性内切酶中,只有少数几种内切酶能够产生超过 4 碱基的突出末端……

    2. 基于反应中酶的稳定性,除非增加酶量,否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息,请参阅限制性内切酶在反应中的活性。

    3. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。

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