高保真(HF?)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart?缓冲液)。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较,虽然价格相同,但性能和性价比更高:
半岛bd体育手机客户端 来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌(
Bacillus stearothermophilus)GR75(Z. Chen)并经修饰的 BsrGI 基因
特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart? 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart? 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 μg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 10%
NEBuffer? r2.1: 100%
NEBuffer? r3.1: 100%
rCutSmart? Buffer: 100%
稀释兼容性
贮存溶液
50 mM NaCl
10 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
50% Glycerol
200 μg/ml Recombinant Albumin
pH 7.4 @ 25℃
热失活
80℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 不敏感
同裂酶
Bsp1407I
BstAUI
注意事项
对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。