• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 酶切位点：CCGCTC(-3/-3)

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大肠杆菌菌株，其携带从 嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）CPW193 克隆的 BsrBI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，在 37℃ 下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 50%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  100 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  同裂酶

  AccBSI
  MbiI
  

• 注意事项
  1. 当 DNA 被 BsrBI 酶切并连接后，只有 50% 的连接位点能够再次产生 BsrBI 识别位点，原因是其识别序列为非回文序列。不可被 BsrBI 再次酶切的连接位点，可被 SacI 或 SacII 酶切。
  2. BsrBI 在 50℃ 下具有完全活性。
  3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。