• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 限制性内切酶酶切位点：ACTGG(1/-1)

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嗜热脂肪芽孢杆菌（Bacillus stearothermophilus）（C. Polisson）

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，65℃ 下，1 小时内酶切 1 µg ΦX174 DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer™ r3.1
  Incubate at65℃

  1X NEBuffer™ r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 µg/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer™ r1.1: <10%
  NEBuffer™ r2.1: 50%
  NEBuffer™ r3.1: 100%
  rCutSmart™ Buffer: 10%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 µg/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam 甲基化: 不敏感
  dcm 甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  Bse1I
  BseNI
  

  在不同温度下的活性

  @37℃: 10%

• 注意事项
  1. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。