• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：GDGCH/C

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自球形芽孢杆菌（ Bacillus sphaericus）（IAM 1286）的 Bsp1286I 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的反应缓冲液中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 25%
  NEBuffer? r2.1: 25%
  NEBuffer? r3.1: 25%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM KCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  400 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  MhlI
  SduI
  

• 注意事项
  1. Bsp1286I 识别六种不同的序列：GGGCCC、GAGCCC（互补 GGGCTC）、GTGCCC（互补 GGGCAC）、GAGCAC、GTGCAC 和 GAGCTC（互补 GTGCTC）。
  2. 对dam、dcm或哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
  3. 甘油浓度 >5% 条件下可能出现星号活性

• 参考文献
  1. Ho, C.K. et al. (2004).Structure. 12, 327-339.
  2. Ho, C.K. and Shuman, S. (2002).Proc. Natl. Acad. Sci. USA.. 99, 12709-12714.
  3. Nandakumar, J. et al. (2004).J. Biol. Chem.. 279, 31337-31347.
  4. Aravin, A. and Tusch, T. (2005).FEBS Letters. 579, 5830-5840.
  5. Pfeffer, S. et al. (2005).Nat. Meth.. 2, 269-276.