• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：GWGCW/C

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus）（P.C. Shaw）的 BsiHKAI 基因

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，65℃ 下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at65℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 25%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  50 mM NaCl
  10 mM Tris-HCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  Alw21I
  Bbv12I
  HgiAI+
  

  在不同温度下的活性

  @37℃: 10%

• 注意事项
  1. BsiHKAI 是 HgiAI 的同裂酶。
  2. 简并识别序列。
  3. 基于反应中酶的稳定性，除非增加酶量，否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
  4. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。