• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 酶切位点：(9/12)ACNNNNNCTCC(10/7)

半岛bd体育手机客户端 来源

嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus）25B（Z. Chen）

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 50%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 10%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 C

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  500 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  50% Glycerol
  0.1% Triton? X-100
  pH 7.6 @ 25℃

  热失活

  否

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

• 注意事项
  1. BsaXI 切割 DNA 底物两次，切下其识别位点后产生一个27 碱基对的片段，该片段包含 5 个碱基的 3' 突出端。
  2. 由于 BsaXI 与 DNA 结合，建议在 16 小时的温育过程中添加不超过 2 个单位的酶量。
  3. 在 NEBuffer r1.1 和 NEBuffer r2.1 缓冲液中可能出现星号活性。
  4. 对于不能热失活的酶，我们建议进行柱纯化（如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒），或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收（建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒），或酚/氯仿抽提。
  5. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化不敏感