- 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 在 rCutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
- 限制性内切酶酶切位点:GR/CGYC
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大肠杆菌菌株,携带有克隆自嗜热脂肪芽孢杆菌(
Bacillus stearothermophilus)CPW11(Z. Chen)的 BsaHI 基因
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 ?l 的反应缓冲液中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。反应条件
1X rCutSmart? 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart? 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 ?g/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 50%
NEBuffer? r2.1: 100%
NEBuffer? r3.1: 100%
rCutSmart? Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
250 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 ?g/ml BSA
50% Glycerol
0.15% Triton? X-100
pH 7.4 @ 25℃
热失活
80℃ for 20 minutes甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
CpG甲基化: 阻断酶切
同裂酶
AcyI
BssNI
BstACI
Hin1I
Hsp92I
- 注意事项
- BsaHI 是 AhaII 的同裂酶。
- 在 60℃°下温育 BsaHI 可将活性提高到 2 倍。
- 某些 dcm 和 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。