• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：GATNN/NNATC

半岛bd体育手机客户端 来源

嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus）B674（Z. Chen）

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，60℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA（dam^-）所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at60℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 50%
  NEBuffer? r2.1: 100%
  NEBuffer? r3.1: 75%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  80℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

  同裂酶

  Bse8I
  BseJI
  

  在不同温度下的活性

  @37℃: 25%

• 注意事项
  1. dam 甲基化与酶切位点重叠以及某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。
  2. 延时酶切可能产生星号活性。