• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 限制性内切酶酶切位点：CACGTC(-3/-3)

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自巨大芽孢杆菌（ Bacillus megaterium）（T. Le）的 BmgBI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X NEBuffer? r3.1
  Incubate at 37℃

  1X NEBuffer? r3.1
  100 mM NaCl
  50 mM Tris-HCl
  10 mM MgCl₂
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: <10%
  NEBuffer? r2.1: 10%
  NEBuffer? r3.1: 100%
  rCutSmart? Buffer: 10%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  200 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 阻断酶切

  同裂酶

  AjiI
  BtrI
  

• 注意事项
  1. BmgBI 是 BtrI 的同裂酶。
  2. 由于 BmgBI 的识别位点为非回文序列，被 BmgBI 切割产生的 DNA 片段连接后，只有 50% 的连接位点能够重新生成 BmgBI 识别位点。
  3. CpG 甲基化阻断酶切。
  4. 基于反应中酶的稳定性，除非增加酶量，否则即便温育时间超过 1 小时也不会提高酶切效率。如需了解有关此主题的更多信息，请参阅限制性内切酶在反应中的活性。
  5. 甘油浓度 ＞5% 条件下可能出现星号活性