高保真（HF^?）限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性，但经过改造后显著降低星号活性，并使用统一的缓冲液（rCutSmart^?缓冲液）。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较，虽然价格相同，但性能和性价比更高：

• 为提高性能进行基因工程改造
• 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性
• 用于 Golden Gate 组装
• 适用于 CRISPR/Cas 基因组编辑中 sgRNA 模板构建
• IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列，并在识别序列之外进行切割
• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 降低星号活性
• 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
• 限制性内切酶酶切位点：GAAGAC(2/6)

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自短芽孢杆菌（ Bacillus brevis）并经修饰的 BbsI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 10%
  NEBuffer? r2.1: 10%
  NEBuffer? r3.1: 10%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 B

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  300 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  500 ?g/ml Recombinant Albumin
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 不敏感

  同裂酶

  BbsI
  BbvII+
  BpiI
  BstV2I
  

• 注意事项
  1. BbsI-HF 的特异性与 BbsI（NEB #R0539）相同，但经过改造后星号活性降低。
  2. BbsI 是 BbvII 的完全同裂酶。
  3. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。