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酶试剂 >> 限制性内切酶
BaeI
BaeI图片
半岛bd体育手机客户端 别名: 限制性内切酶BaeI
限制酶产地: 国产限制性内切酶
半岛bd体育手机客户端 介绍
  • 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
  • 在 rCutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
  • 限制性内切酶酶切位点:(10/15)ACNNNNGTAYC(12/7)

半岛bd体育手机客户端 来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自球形芽孢杆菌( Bacillus sphaericus)SDZ-8(R. Morgan)的 BaeI 基因

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 ?g Lambda DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart? 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart? 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 ?g/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer? r1.1: 50%
    NEBuffer? r2.1: 100%
    NEBuffer? r3.1: 50%
    rCutSmart? Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 ?g/ml BSA
    0.32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    65℃ for 20 minutes

    甲基化敏感性

    dam甲基化: 不敏感
    dcm甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切

    在不同温度下的活性

    @25℃: 100%

  • 注意事项

    1. BaeI 切割 DNA 底物两次,切下其识别位点后产生一个 28 碱基对的片段,该片段包含 5 个碱基的 3? 突出端。
    2. BaeI 除了在其确定的切割位点处切割,也能在其识别位点外的一个碱基对处进行切割。
    3. 某些 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切。

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