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酶试剂 >> 限制性内切酶
ApaLI
ApaLI图片
半岛bd体育手机客户端 别名: 限制性内切酶ApaLI
限制酶产地: 国产限制性内切酶
半岛bd体育手机客户端 介绍
  • 符合省时酶(Time-Saver?)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
  • 在 rCutSmart?缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
  • 酶切位点:G/TGCAC

半岛bd体育手机客户端 来源

大肠杆菌菌株,携带来自巴氏醋酸杆菌( Acetobacter pasteurianus)(ATCC 12875)的 ApaLI 基因。

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 ?g λ DNA(HindIII 消化)所需的酶量。

    反应条件

    1X rCutSmart? 缓冲液
    Incubate at 37℃

    1X rCutSmart? 缓冲液
    50 mM Potassium Acetate
    20 mM Tris-acetate
    10 mM Magnesium Acetate
    100 ?g/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25℃)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer? r1.1: 100%
    NEBuffer? r2.1: 100%
    NEBuffer? r3.1: 10%
    rCutSmart? Buffer: 100%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 ?g/ml Recombinant Albumin
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25℃

    热失活

    甲基化敏感性

    dam甲基化: 不敏感
    dcm甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切

    同裂酶

    Alw44I
    VneI

  • 注意事项

    1. 哺乳动物基因组 DNA 的 CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。
    2. ApaLI 不能切割 M13 DNA。M13 DNA 中存在一个 ApaLI 识别位点的报道是由于测序错误所致。正确的序列为 GTGCTC,能够被 BsiHKAI 或 Bsp1286I 切割。
    3. 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。

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