• 符合省时酶（Time-Saver?）标准，可在 5-15 分钟内完成酶切
• 在 rCutSmart^?缓冲液中具有 100% 活性（超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液），便于进行双酶切
• 限制性内切酶酶切位点：GACNNN/NNGTC

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大肠杆菌菌株，携带有克隆自嗜水气单胞菌（ Aeromonas hydrophila）（C. Polisson）的 AhdI 基因。

• 特性和用法

  单位定义

  一个单位是指在 50 ?l 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 ?g λ DNA 所需的酶量。

  反应条件

  1X rCutSmart? 缓冲液
  Incubate at 37℃

  1X rCutSmart? 缓冲液
  50 mM Potassium Acetate
  20 mM Tris-acetate
  10 mM Magnesium Acetate
  100 ?g/ml Recombinant Albumin
  (pH 7.9 @ 25℃)

  在不同缓冲液中的活性

  NEBuffer? r1.1: 25%
  NEBuffer? r2.1: 25%
  NEBuffer? r3.1: 10%
  rCutSmart? Buffer: 100%

  稀释兼容性

  • 稀释液 A

  贮存溶液

  10 mM Tris-HCl
  50 mM NaCl
  1 mM DTT
  0.1 mM EDTA
  200 ?g/ml BSA
  50% Glycerol
  pH 7.4 @ 25℃

  热失活

  65℃ for 20 minutes

  甲基化敏感性

  dam甲基化: 不敏感
  dcm甲基化: 不敏感
  CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合影响酶切

  同裂酶

  BmeRI
  DriI
  Eam1105I
  

• 注意事项
  1. AhdI 是 Eam1105I 的同裂酶。
  2. AhdI 切割产生的 DNA 片段含有单碱基 3? 突出末端，它比平末端更难连接。
  3. CpG 甲基化与酶切位点重叠。
  4. 使用平末端/TA 连接酶预混液可实现更高效的连接