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大肠杆菌菌株,携带有来自醋酸钙不动杆菌(
Acinetobacter calcoaceticus)M4(S.K. Degtyarev)的 AclI 基因。
特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart? 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart? 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 μg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1:<10%
NEBuffer? r2.1:<10%
NEBuffer? r3.1:<10%
rCutSmart? Buffer: 100%
稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
100 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 μg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否
甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 阻断酶切
同裂酶
Psp1406I
注意事项
AclI 是 Psp1406I 的同裂酶。
对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch? PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch? DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
CpG 甲基化阻断酶切。