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大肠杆菌菌株,携带有克隆自醋酸钙不动杆菌(
Acinetobacter calcoaceticus)65(S.K. Degtyarev)的 Acc65I 基因。
特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,37℃ 下,1 小时内酶切 1 μg pBC4 DNA 所需的酶量。
反应条件
1X NEBuffer? r3.1
Incubate at 37℃
1X NEBuffer? r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 μg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer? r1.1: 10%
NEBuffer? r2.1: 75%
NEBuffer? r3.1: 100%
rCutSmart? Buffer: 25%
稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
100 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 μg/ml BSA
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam甲基化: 不敏感
dcm甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
CpG甲基化: 某些甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切
同裂酶
Asp718I
KpnI
KpnI-HF
注意事项
Acc65I 是 KpnI 的异裂酶。
在 NEBuffer 2.1 缓冲液中可能出现星号活性。
某些 dcm 和 CpG 甲基化与酶切位点的重叠组合阻断酶切