货号: | 3985688 |
品牌: | GOYOO |
纯度含量: | ≥95% |
CAS NO: | 126150-97-8 |
半岛bd体育手机客户端 别名: | BAPTA, AM |
外观 | 白色粉末 |
分子式 | C34H40N2O18 |
分子量 | 764.68 |
储存条件 | -20℃干燥避光保存 |
运输条件 | 常温 |
保质期 | 12个月 |
BAPTA, AM是一种细胞内钙离子选择性螯合剂。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成BAPTA,从而被滞留在细胞内。BAPTA基本的螯合单位和EDTA类似,只是两个脂肪氮被芳香氮所替代。因此,BAPTA在生理pH下不会被质子化。BAPTA的pKa3为5.47,pKa4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在钙的螯合步骤中。由于不受质子的干扰,它的螯合率比EGTA高很多。
使用方法
(1) 溶解方法
将25mg BAPTA, AM加入到 654μL无水DMSO中,配制50 mM stock solution。
保存stock solution的方法和保存时间*:
A、由于AM体遇水容易分解,所以我们推荐现配现用。
B、使用无水DMSO,在冷冻的条件下,可以保存约1~2个月。
(2) 使用方法
稀释stock solution,添加细胞。
稀释浓度:少的 6~8 μM,多的50 μM
* 由于BAPTA, AM是非水溶性,稀释时先再添加DMSO后,添加水溶液(特别是使用培养液时)。不然的话,BAPTA, AM的结晶有可能出来。关于添加的DMSO的量,考虑细胞的毒性,应该低于1%以下。
* 由于BAPTA, AM是非水溶性,所以稀释时慢慢添加水溶液。
* 如果不想再添加DMSO的话,也有添加Pluoronic F127的方法。添加Pluoronic F127时,先添加到母液后,使用PBS等水溶液稀释。
* stock solution和PBS等水溶液混合时,将stock solution添加到PBS等水溶液里。
例1) 10 μM,使用2 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution
再添加的DMSO量:0μL(DMSO最终浓度:0.02 %)
添加的水溶液的量:10 mL
方法:2 μL BAPTA, AM stock solution +10 mL PBS等水溶液
例2) 25 μM,使用5 μL 50 mM BAPTA, AM stock solution
再添加的DMSO量:95 μL(DMSO最终浓度:1%)
添加的水溶液的量:10 mL
方法:(1) 5 μL BAPTA, AM stock solution + 95 μL DMSO
(2) 10 mL PBS等水溶液 + 100μL 的(1)
关于细胞的量,不同的细胞使用不同的细胞量。一般来说,Fura-2, AM及Fluo-3, AM一样的量*。
论文里面有如下的条件,请参考。
例1) 1.75×10-4 cells/cm2,25 μM BAPTA, AM
培养时间:20~60 分钟
* 如果培养时间太长的话,很多BAPTA, AM进入细胞内,对细胞不好(毒性高)。