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High Pure FFPE RNA Micro Kit

高纯 FFPE RNA Micro 试剂盒

品牌
Roche
货号
04823125001
规格纯度
kit of for 50 isolations
价格
3950.67 *本价格含增值税费
促销
服务
  • 原厂保证
  • 包邮
  • 增值税票
数量
- +
半岛bd体育手机客户端 名称:
High Pure FFPE RNA Micro Kit
高纯 FFPE RNA Micro 试剂盒
半岛bd体育手机客户端 介绍:

半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

从游离 FFPE 组织切片中分离低至中等通量的微量总 RNA。

应用

高纯 FFPE RNA Micro 试剂盒从福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 的组织样本中分离出总 RNA,直接用于:

  • 定性 RT-PCR
  • mRNA 的相对定量与实时 PCR 系统,如 LightCycler?480 系统
  • 差异显示 RT-PCR
  • cDNA 合成
  • 引物延伸

特点和优势

在离液盐(盐酸胍)存在下,核酸结合到玻璃纤维织物的表面。这使得高纯度过滤器管能够在核酸(DNA 和 RNA)清除污染物的同时特异性地固定它们。对于 RNA 分离,可以优化结合条件以确保固定所有的 RNA。

大小分布:从福尔马林固定的组织中分离得到的 RNA 典型大小为 150~1500 个碱基。然而,切片厚度、组织类型、样本年龄和使用的固定方案会影响分离 RNA 的产量和质量。
容量:高纯度的微量过滤管可容纳 500μl 样品体积。
样品材料:1-10μm 福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 的组织切片(例如,来自哺乳动物物种的结肠、乳腺、肝脏、肾脏、脾脏)。
高纯 FFPE RNA Micro 试剂盒从福尔马林固定、石蜡包埋 (FFPE) 的组织样本中分离总 RNA,直接用于 RT-PCR。

  • 简化 FFPE 组织中的 RNA 分离(甚至是小的 RNA 片段)。
  • 获得高浓度、即用型洗脱液和极佳的 RNA 回收率 ( 80%)。
  • 分离无 DNA RNA,用于定性和定量 RT-PCR。
  • 用一个试剂盒去除污染物将核糖核酸损失降至最低,无需沉淀或其他降解核糖核酸的处理步骤。
  • 生成高质量模板RNA,在 RT-PCR 中表现出优异的性能和线性。

组分

  • 组织裂解缓冲液
  • 蛋白酶 K,重组,PCR 级
  • 结合缓冲液
  • 洗涤缓冲液 I
  • 洗涤缓冲液 II
  • DNase I,重组,冻干
  • DNase 孵育缓冲液
  • 洗脱缓冲液
  • 高纯微量过滤管
  • 收集管

质量

将福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片通过过夜蛋白酶 K 消化进行匀浆,并按照描述进行纯化。通过测量 260 nm 处的光密度确定 RNA 产量。
一步法 RT-PCR 使用 β2M 基因的 RNA 洗脱液和特异性引物。在 LightCycler?2.0 半岛游戏平台官网入口网址 上的以下 PCR 中(使用 LightCycler?RNA Amplification Kit SYBR Green I 和针对 β2M),在 Cp 值小于 24 时获得预期扩增信号。
在无逆转录酶步骤的 LightCycler?2.0 半岛游戏平台官网入口网址 上通过 PCR 检查是否存在污染性基因组 DNA;未获得扩增产物。

制备说明

要制备 RNA 分离的组织切片,必须去除样本中的固定试剂;脱蜡后的切片即可用 High Pure FFPE RNA Micro Kit 进行处理。在用蛋白酶 K 和离液盐(盐酸胍)孵育期间,破坏并均质化脱蜡组织样本。然后将匀浆应用于高纯微量过滤管中的玻璃纤维羊毛上。

在程序中使用的缓冲条件下,所有核酸均与玻璃纤维羊毛特异性结合,而污染物质(盐、蛋白质和其他组织污染物)则不会。用 DNase I 直接在过滤器上消化制备液中的 DNA。简单的洗涤和离心步骤可轻易去除消化的 DNA 片段和其他污染物质。剩余的纯化 RNA 然后在小体积的低盐缓冲液中洗脱。

分析说明

典型 RNA 回收率

起始物料及用量:1-10μm FFPE 切片,哺乳动物种属的结肠、乳腺、肝脏、肾脏、脾脏
收率/回收率:1.5-3.5 μg/5 μm 切片
所需时间:60 min,未孵育 3 小时
反应数量:50/1-10μm 切片

其他说明

高纯技术和二氧化硅吸附试剂盒
用于常规实验室用途。

法律信息

LightCycler is a registered trademark of Roche

半岛bd体育手机客户端 性质

质量水平 100
manufacturer/tradename Roche
包装 kit of for 50 isolations

安全信息

象形图 GHS05GHS07GHS08
警示用语: Danger
危险声明 H302 + H312 + H332 - H314 - H317 - H334 - H335 - H412
预防措施声明 P260 - P280 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310 - P342 + P311
危险分类 Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Corr. 1B - Skin Sens. 1 - STOT SE 3
靶器官 Respiratory system
补充剂危害 EUH032
储存分类代码 13 - Non Combustible Solids
WGK WGK 2
闪点(F) does not flash
闪点(C) does not flash

Sigma-Aldrich

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