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DIG-High Prime

品牌
Roche
货号
11585606910
规格纯度
sufficient for 40 labeling reactions, pkg of 160 μL, solution
价格
9326.23 *本价格含增值税费
促销
服务
  • 原厂保证
  • 包邮
  • 增值税票
数量
- +
半岛bd体育手机客户端 名称:
DIG-High Prime
半岛bd体育手机客户端 介绍:

半岛bd体育手机客户端 说明

一般描述

DIG-High Prime是酶和核苷酸的混合物,用于用地高辛-11-dUTP 快速标记随机引物DNA。在此方法中,将随机寡核苷酸的3′-OH末端作为引物,由Klenow聚合酶合成变性DNA的互补DNA链。经一小时孵育或过夜孵育后,得到高产量的DIG 标记探针。
我们致力于为您提供更环保的替代半岛bd体育手机客户端 ,以符合“绿色化学的12项原则”的一项或多项原则要求。该半岛bd体育手机客户端 设计为更安全的化学品。 DIG系统是灵敏且具有成本效益的方案,可替代放射性标记和放射法检测核酸。有许多已发表论文证明DIG系统的通用性,因此,使用放射性标记不再是标记用于杂交DNA的唯一选择。

特异性

热灭活:通过加入 2 μl 0.2 M EDTA(pH8.0)和/或加热至 65℃ 10 分钟来终止反应。

应用

DIG-High Primer标记DNA探针用于多种杂交技术:

  • Southern 印迹
  • Northern 印迹
  • 斑点/狭缝印迹
  • 筛选基因文库
  • 原位杂交
由于高度特异性和灵敏的检测系统,DIG 标记 DNA 探针可用于 1μg 总人类 DNA中的单拷贝基因检测。对碱不稳定的 DIG-dUTP 中,地高辛部分由碱不稳定酯键与间隔臂连接,这样能够更轻松有效地剥离印迹和重新标记印迹。

特点和优势

DIG-High Prime 保证有效标记:

  • 标准反应中 DNA 含量范围为 10ng 至 3μg。
  • 不同长度的 DNA,从小的限制性片段到 λ 或粘粒 DNA。
  • DNA,超螺旋或线性化。
  • 低熔点琼脂糖中的 DNA。

标记效率:
用 1μg 模板进行的标准标记反应在 1 小时后产生 0.8μg 新合成的洋地黄毒苷标记的 DNA,在 + 37℃ 温育 20 小时后产生 2μg。

内容
5x 浓缩的随机引物混合物:1U/ μl Klenow 聚合酶,标记级,1mM dATP,1mM dCTP,1mM dGTP,0.65mM dTTP,0.35mM DIG-11-dUTP,在 50%(v/v)甘油中碱不稳定。

质量

功能测试:
在 1μg 线性化 pBR 328 的标准测定中,1 小时后合成 0.8μg DIG 标记的 DNA,20 小时后合成 2.3μg。当该标记的 DNA 用于以 20ng/ml 的浓度杂交时,通过化学发光,用抗 DIG-碱性磷酸酶缀合物和 CSPD 在斑点印迹或 Southern 印迹上检测 0.03pg 同源 DNA。

原理

根据随机引物标记技术,用 DIG-High Prime 产生 DIG 标记的 DNA 探针。DIG-High Prime 是一种专门开发的反应混合物,含有地高辛-11-dUTP 和随机引物标记所需的所有试剂,包括 Klenow 酶,在优化的 5x 浓缩反应缓冲液(在 50% 甘油中)中预混合。

制备说明

反应混合物或杂交缓冲液中的 DIG 标记的探针在 -15 至 -25℃ 下可稳定储存超过 12 个月。如果在使用前新鲜变性,它们可以重复使用几次。

检测时间:80 分钟

样品材料

  • 至少 100bp 的 DNA 片段
  • 线性化质粒,粘粒或 λDNA
  • 超螺旋 DNA
  • 或最小量的 DNA(10ng),例如从凝胶或熔融琼脂糖中分离的 DNA 限制片段

注意:为了获得最佳结果,模板 DNA 应该线性化,并且片段长度为 100bp,或更长。如果 DNA 模板 >5kb,在标记前使用 4bp 切口的限制性内切酶进行限制性消化。

其他说明

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

半岛bd体育手机客户端 性质

形式 solution
质量水平 100
用途 sufficient for 40 labeling reactions
包装 pkg of 160 μL
manufacturer/tradename Roche
环保替代半岛bd体育手机客户端 特性 Designing Safer Chemicals
Learn more about the Principles of Green Chemistry.
环保替代半岛bd体育手机客户端 分类 Aligned
运输 dry ice
储存温度 ?20℃

安全信息

储存分类代码 12 - Non Combustible Liquids
WGK WGK 1
闪点(F) No data available
闪点(C) No data available

Sigma-Aldrich

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